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典型的G蛋白偶聯(lián)受體傳遞信號(hào)的基本原理是:特異性的配體結(jié)合到相應(yīng)的7次跨膜的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)上,引起GPCR構(gòu)象的變化;構(gòu)象變化之后的GPCR能夠結(jié)合相應(yīng)的GDP結(jié)合狀態(tài)的三聚體G蛋白,并誘導(dǎo)三聚體的Ga 亞基構(gòu)象發(fā)生變化,釋放結(jié)合的GDP。處于空置狀態(tài)的Ga 亞基迅速與周圍環(huán)境中的GTP結(jié)合。結(jié)合了GTP的Ga 亞基立即與GPCR和Gbg亞基復(fù)合物分離(如圖)。自由的Ga 亞基和Gbg 亞基分別與下游的效應(yīng)蛋白結(jié)合,通過(guò)調(diào)控效應(yīng)蛋白的活性來(lái)實(shí)現(xiàn)信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)。Ga 亞基在同效應(yīng)蛋白結(jié)合的同時(shí)或者之后,水解結(jié)合的GTP成為GDP,于是Ga 亞基在自身的調(diào)節(jié)下關(guān)閉功能,回到非活性的GDP結(jié)合狀態(tài),并與Gbg 亞基形成三聚體,等待下一次信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。三聚體G蛋白就是通過(guò)這樣的循環(huán)來(lái)實(shí)現(xiàn)分子信號(hào)的“開(kāi)”與“關(guān)”,從而使得信號(hào)能夠得到正確有效的傳導(dǎo)。 Wuhan NewEast Biosciences Co.Ltd 的科學(xué)家發(fā)明了一種高度靈敏的基于特異性單克隆抗體的檢測(cè)方法。該方法基于能夠特異性識(shí)別GTP結(jié)合狀態(tài)的三聚體G蛋白或者小G蛋白的單克隆抗體,利用方便快捷的試劑盒,能夠迅速檢測(cè)出G蛋白是否處于激活狀態(tài)。該方法除了具有簡(jiǎn)單、易操作、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)以外,還有一個(gè)最為吸引人的優(yōu)勢(shì):具有捕捉到被固定的細(xì)胞內(nèi)的G蛋白的活化狀態(tài)的可能性。而這正是很多研究G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的科學(xué)家所夢(mèng)寐以求的功能。目前,該類型試劑盒已經(jīng)被100多篇高水平研究論文所引用。隨著這些檢測(cè)方法的普及,G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究進(jìn)展必將進(jìn)一步加快。該試劑盒中能夠特異性識(shí)別GTP結(jié)合狀態(tài)的三聚體G蛋白或者小G蛋白的單克隆抗體,適應(yīng)各種種屬(Human,Mouse,Rat,Rice plants,Pig Cotton,bacteria,Escherichia coli等)應(yīng)用范圍非常廣泛( IP , ,IHC IF ICF,ICC,IHF.FC,Elisa 等)隨著這些應(yīng)用的普及,G 蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究進(jìn)展,必將進(jìn)一步加快。
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